Komplexní přístup popsaný v doprovodném článku je zde ilustrován 23Na signálem koncentrovaného roztoku hovězího sérového albuminu (BSA) ve fyziologickém roztoku a intracelulární (Nai) 23Na rezonancí husté suspenze kvasinkových buněk naložených Na(+)-. K rozlišení této rezonance od extracelulární rezonance používáme činidla s frekvenčním posunem. Zjistili jsme, že signál Nai odpovídá efektivní jediné populaci iontů Na+ vykazující jediné spektrum typu c. To platí navzdory skutečnosti, že kvasinková protoplazma je příliš velká a příliš kompartmentalizovaná na to, aby daný Na+ iont mohl odebírat vzorky v celém rozsahu v příslušném časovém měřítku NMR. Naše výsledky jasně ukazují, že kromě rozpadu příčné magnetizace je obnovení podélné magnetizace biexponenciální. To je nutné pro spektrum typu c, ale nebylo často zjištěno. Teplotní závislost rychlostních konstant relaxace Naiovy rezonance neodpovídá ani jednoduchému Debyeho procesu, ani diskrétnímu výměnnému mechanismu spojujícímu dvě místa v rychlé limitě. Data jsme přizpůsobili pomocí asymetrického spojitého rozdělení korelačních časů pro fluktuace gradientů elektrického pole snímaných jádry Nai. Analogická distribuční funkce pro Na+ ve 44% (w/w) roztoku BSA je dosti podobná distribuční funkci pro Nai při stejné teplotě. To naznačuje, že makromolekulární prostředí iontů Nai je sice značně přetížené, ale zároveň izotropní na poměrně malém prostorovém měřítku. K výpočtu relaxometrické křivky lze také použít distribuční funkci korelačního času, získanou fitováním relaxačních dat. To je užitečné, protože experimentální 23Na relaxometrie je obtížná. Vypočtená křivka může být rozumným modelem pro většinou extracelulární rezonanci 23Na, se kterou se setkáváme in vivo.

Leave a comment

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.